2011年第二期:医药废水中大肠杆菌抗体制备及检测方法
医药废水中大肠杆菌抗体制备及检测方法
范治国,庄惠生,王倩煜
(上海交通大学,上海200240)
摘要 该文研究制备了大肠杆菌全菌体抗体,经纯化后抗体蛋白含量为2.50 mg/mL,测得全菌体抗体的效价大于25 600,并使用自制的抗体,建立了测定医药废水中大肠杆菌的间接酶联免疫吸附(ELISA)方法。间接ELISA 方法的最佳测定条件为:抗原最佳包被浓度为200 倍,一抗和酶标二抗的稀释浓度分别为稀释12 800 倍和2 000 倍,以0.5% 牛血清白蛋白(BSA)作为封闭液,封闭时间为2h。在最佳测定条件下,大肠杆菌在1·103~1·109 cfu/mL 表现出良好的线性关系。采用所建立的间接ELISA 方法检测了实际医药废水中的大肠杆菌,检测限为103 cfu/mL。
关键词 大肠杆菌 全菌体抗体 医药废水 间接酶联免疫吸附测定法
中图分类号:TU992.3 文献标识码:A 文章编号:1009-0177(2011)02-0068-04
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